С периодом правления Сигизмунда I Старого связано и появление в государстве последователей протестантизма. Сам великий князь относился к идеям Реформации негативно, однако не препятствовал распространению новых идей среди своих подданных. Это способствовало укреплению веротерпимости в государстве и консолидации шляхетского общества.
